试验室常用试验办法介绍--浓缩法介绍

  在抽提液中参加适量的中性盐或有机溶剂,使有效成分变为沉积。经离心除掉不溶物,取得的上清液经过透析或凝胶过滤脱盐,即可供纯化运用。

  将干葡聚糖凝胶G25(或吸水棒)参加抽提液中,两者份额为1:5。因为凝胶吸水之故,抽提液的体积可缩小三倍左右,收回蛋白质量约80%.若凝胶(或吸水棒)对有效成分吸附力强或吸水后有效成分的性质有影响时,此法不宜选用。

  把抽提液装入超过滤设备,在空气或氮气(5.05×105Pa)压力下,使小分子物质(包含水分)经过半透膜(如硝酸纤维素膜),大分子物质留在膜内。

  把装抽提液的透析袋埋在吸水力强的聚乙二醇(polyetheylene glycol PEG 分子质量大于20kDa)或甘油中,10ml抽提液可在1h内浓缩到简直无水的程度。

  将抽提液装入减压蒸馏器的圆底烧瓶中,在减压真空状况下进行蒸馏。当真空度较高时溶液的沸点可控制在30℃以下。这种办法一般适用于常温下稳定性高的物质。

  冰冻的抽提液在真空状况下,能够由固体直接变为气体。用此原理进行浓缩,有效成分简直不会损坏。冻干机主要由低温枯燥箱、真空泵和冷冻机构成。在冻干小体积样品时,能够将其置玻璃真空枯燥器中进行。详细作法是,把分装至小瓶中的样品冰冻后放入装有五氧化二磷或硅胶吸水剂的真空枯燥器中,接连抽真空使其到达浓缩、枯燥状况。

  上述的浓缩办法(除第五种外),一般都在低温进行。这一些办法不只适用于抽提液的浓缩处理,并且也适用于纯品溶液缩小体积。

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